3D原位細胞切割成像系統

原位細胞3D切割成像平臺

■  染色體切割

■  亞細胞器的實時觀測切割

■  原位組織的單細胞分離

■  薄組織的顯微切割

■  基于激光的光轉染技術

是一款非接觸的3D納米激光活細胞顯微成像切割系統。它具特色的多光子切割技術，能夠從細胞內或組織內的任意點開始切割，實現真正意義上的定點操作。并且CellSurgeon還配有MPM成像模塊，能夠實現實時的熒光標記或無標記成像，定位所需操作的部位和實時觀測細胞動態變化。通過CellSurgeon研究者能夠進行實時的活細胞、組織操作和觀測，幫助研究者更好的研究原位細胞的生理活性

傳統切割對比

有別于傳統的薄片切割系統，這種切割無需借助外力，能夠有效避免金屬刀片帶來的金屬污染和機械力損傷。

這種切割技術也克服了傳統激光切割技術必須從表面開始切割并且會灼燒樣品的缺點

使用特的雙光子切割技術，有效避免傳統激光切割缺點，真正做到了從任意點開始的3D切割，并且對于樣品沒有灼燒

傳統（左）--本系統（右）

突破優勢：

■  更適合樣本種類：小鼠脛骨等小鼠骨骼系統，牙齒，樣本較小；

■  更適合高精度的激光切割，切片后直接染色成像；

■  可切割的樣品種類：牙齒、骨骼等生物硬組織，各種聚合物材料，軟組織，含有金屬的硬組織或者軟組織

■  樣品處理方式：硬組織無需脫鈣、軟組織無需固定

■  可適用染色方法：HE染色常規及TRAP、Masson等特殊染色方法

■  切片過程全自動控制

■  薄切片厚度：硬組織切片10 μm

■  切片速度：≥1 mm2/s

■  切割過程不會污染、灼傷或機械力損傷樣品

■  激光光源類型：紅外飛秒脈沖激光

■  成像技術：光學相干斷層掃描（OCT）

3D原位細胞切割成像系統

應用：

可視化切片系統，實現邊看邊切

對于病理等多種研究來書，涉及到組織切片的內容， 困難的部分莫過于尋找病變部位。 相比一個完整組織來說， 有時候研究者所關注的部分僅僅是其中變異的一小部分組織的形態而已。 但是對于傳統切片手段來說， 缺乏一種有效的手段來定位這個區域， 因此往往需要投入大量人力和物力去多次制樣，大量切片來尋找這個部位。 TissueSurgeon 自身集成了適合深層組織細胞成像的光學相干斷層掃描（OCT）成像功能， 幫助您直接定位到 ROI 區域。 讓切片變得可視化， 實現更加和可控的切片。為研究者更加迅速直觀的找到病變位置，大大提高了研究效率。

青鳉胚胎組織的單細胞提取

單細胞的原位組織提取一直以來都是一項十分困難的工作，這主要受制于組織之間連接致密難以消化，而機械力往往很難地將單個細胞與組織完整的分離。激光切割具有傳統切割技術所難以匹及的切割精度，是目前一種比較理想的切割手段，因此圍繞激光切割技術的相關顯微產品也孕育而生，并在科研領域中越來越受到關注。但是激光切割也有其局限性，先顯微激光切割往往要從表面開始，無法對深層組織進行切割；另一方面激光的光源往往采用紫外激光光源，這種類型的光源很容易造成組織灼傷，從而影響切割下來樣品的品質，因此激光切割的應用發展也受到了諸多限制。

青鳉是一種成熟的模式生物，常用于分析發育和發育過程中的細胞信號神經生物學研究。其中使用表達熒光蛋白的轉基因胚胎是一種揭示胚胎發育的良好方法。隨著基因技術的發展，研究者們越來越多地開始關注這些標記細胞中轉錄組中的信息。雖然單細胞測序技術發展迅速，但是從組織中獲得單細胞的手段卻十分有限。目前幾乎沒有手段能夠直接在組織的原位上快速獲取一個細胞，但是基于ROWIAK雙光子切割技術，研究者成功地在這方面取得了一些進展。

為了研究青鳉感覺神經分泌細胞細胞群中特定表達m-cherry的轉基因細胞的內部遺傳信息，將ROWIAK雙光子3D組織切割成像系統與傳統的顯微操作系統進行結合，成功實現了對目標細胞的原位分離。

利用雙光子3D組織切割成像系統對青鳉胚胎中的mcherry細胞進行了定位，然后根據其細胞群的形態設定了切割部位，隨后系統根據預先設定的范圍進行切割。待切割完成后使用玻璃微管移液器將目標的細胞部位直接取出，即獲得了目標組織區域。這種方法能夠在不破壞樣品原位信息的情況下將感興趣的部位直接的分離，這對于揭示生物體的基因表達情況具有著深遠的意義

基于激光的原位細胞轉染

無論是電轉還是脂質體都需要先將細胞懸浮才能夠進行入轉染，但是Cellsurgeon能夠在原位對細胞進行光穿孔實現細胞的轉染